วิธีแยกเนื้อเยื่อจากดอกเห็ด

อุปกรณ์ที่สำคัญได้แก่

1.  เข็มเขี่ยเชื้อ ด้ามทำด้วยโลหะหรือวัสดุทนไฟ และเป็นตัวนำความ ร้อนที่เลว ส่วนปลายเข็มเขี่ยทำด้วยลวดนิโครม หรืออาจทำง่าย ๆ โดยใช้ลวดเตา ไฟฟ้ายาวประมาณ 4 เซนติเมตร ใช้ลวดอลูมิเนียมขนาดหุนครึ่งบวกด้วยเลื่อยฉลุลึกประมาณ 1 เซนติเมตร แล้วเสียบลวดลงไป ใช้ฆ้อนตอกและทุบด้ามอลูมิเนียมให้หนีบลวดไว้ให้แน่น ลับปลายลวดให้คม ดัดปลายลวดให้งอเป็นมุมฉากประมาณ .5 เซ็นติเมตร

2. ตะเกียงแอลกอฮอล์ จะใช้ตะเกียงอะไรก็ได้ แต่เชื้อเพลิงภายในต้อง เป็นแอลกอฮอล์ เพราะเวลาเผาไหม้แล้วจะไม่มีควัน

3. มีดคม ๆ

4. ตู้เขี่ย ถ้าเป็นที่ลมสงบ สังเกตจากเปลวไฟตั้งตรง จะไม่ใช้ตู้เขี่ยก็ได้ โดยทำการเช็ดพื้นให้สะอาดด้วยแอลกอฮอล์ หรือใช้ผ้าสะอาดชุบน้ำแล้วบิดหมาด ๆ ปูก็ได้

วิธีเขี่ยเนื้อเยื่อจากดอกเห็ด

ให้แกะดอกเห็ดโดยใช้เล็บ หรือใช้มีดนำทาง ก่อนเล็กน้อย แล้วใช้มือแกะออกเป็น 2 ส่วนเท่า ๆ กัน จากนั้นลนปลายเข็มเขี่ยให้ร้อนแดงด้วยตะเกียงแอลกอฮอล์ วิธีลนที่ถูกต้องจะต้องลนให้ตั้งตรงกับเปลวไฟ จับเข็มเขี่ยตรงโคนคล้ายจับปากกา เมื่อลนเข็มเขี่ยแล้วปล่อยให้เย็นประมาณ 15 วินาที หรือหายใจเข้าออกประมาณ 3-5 ครั้ง อย่าแกว่งหรือไปสัมผัสสิ่งใด ๆ มืออีกข้างให้จับดอกเห็ดที่เตรียมไว้ ใช้ปลายเข็มเขี่ย เขี่ยเอาเนื้อเยื่ออยู่บริเวณโคนของก้านดอกเห็ดที่เปิดใหม่เพียงเล็กน้อย แล้วเปลี่ยนมือที่จับดอกเห็ดมาจับขวดอาหารวุ้นแทน วิธีจับขวดที่ดีควรให้ก้นขวดอยู่ในอุ้งมือและต่ำกว่าปากขวด เพราะมือจะไม่บังอาหารวุ้น และสะดวกในการเขี่ยเชื้อ จากนั้นใช้นิ้วก้อยของมือที่จับเข็มเขี่ยจับจุกสำลีหมุนและดึงออก ขณะถอดจุกสำลีออกให้ลนไฟบริเวณคอขวดไว้ตลอดเวลา ต่อจากนั้นก็สอดเนื้อเยื่อที่ตัดไว้เข้าไปวางไว้จุดใดจุดหนึ่งบนอาหารวุ้นก็ได้ เสร็จแล้วให้รีบปิดจุกสำลีนำไปวางนอนในห้องที่มีอุณหภูมิประมาณ 34-38° ซ. ถ้าเป็นห้องมืดได้ยิ่งดี เพราะเห็ดทุกชนิดขณะที่มีการเจริญเติบโตทางเส้นใยไม่ต้องการแสง ถ้ามีแสงจะเดินช้าแก่เร็ว เก็บไว้ประมาณ 5-7 วัน เส้นใยเห็ดจะเดินเต็มอาหารวุ้น พร้อมที่จะนำไปใช้ได้เลย ไม่ควรเก็บไว้นานเกิน 10 วัน หากจะเก็บไว้นานควรเก็บไว้ในตู้เย็นชั้นเก็บผัก ถ้าจะเอาออกมาใช้จะต้องถ่ายเชื้อเห็ดลงในอาหารวุ้นใหม่ก่อน ถึงจะนำไปใช้ได้ ไม่เช่นนั้นถ้าตัดต่อจากขวดที่เก็บไว้ในตู้เย็นโดยตรงจะทำให้เชื้อเห็ดเจริญช้ามาก

ในการแยกเชื้อครั้งต่อไป ไม่จำเป็นต้องแยกจากดอกเห็ดอีก แต่จะทำการ ตัดเอาเส้นใยพร้อมทั้งอาหารวุ้นภายในขวดประมาณ 1 ตารางเซนติเมตร ใส่ลงในอาหารวุ้นขวดใหม่ก็ได้ แต่ในการถ่ายเชื้อไม่ควรเกิน 7-10 ครั้ง เพราะเชื้อเห็ดจะเสื่อมลง